产品详情
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一款具有多孔氮化硅膜的µ-Slide载玻片,可用于实时观察流动或静态条件下的细胞侵袭、迁移以及细胞相互作用的可视化的“ transwell ”
产品特点:
* 透过薄而多孔的薄膜获得##的光学性能
* 有着广泛的应用,细胞可完全粘附到顶部-基底
* 对于不同细胞类型有多种孔径大小可以选择
应用:
1. 流动状态下跨内皮细胞迁移
2. 2D或3D凝胶内细胞层的共培养和传输分析
3. 顶部-基底细胞极性分析
4. 顶部-基底梯度的细胞屏障模型分析
5. 细胞迁移分析(例如,用于研究肿瘤侵袭或转移)
在µ-Slide ibiPore IV型胶原涂层3µm孔径中人类内皮细胞的免疫荧光染色,相位对比度、DAPI(蓝色)、VE钙粘蛋白(绿色)和F肌动蛋白(红色)的叠加图像。
技术特点:
1.SiMPore的微孔氮化硅膜
2.中间具有多孔光学膜的跨通道结构
3.优异的光学性能,堪比盖玻片
4.孔径大小0.5μm,3μm,5μm,8μm供选择
5.中间膜0.4µm(400 nm)
6.使用工作距离>0.5mm的物镜
7.与ibidi泵系统(流体剪切力系统)完全兼容
8.下部通道中明确的剪切力和剪切速率范围(更多详情请参见“应用“栏中的《 AN11_Shear_stress》)
µ-Slide ibiPore SiN 工作原理
µ-Slide ibiPore SiN由插入两个通道之间的水平多孔膜组成。上部通道是膜上方的静态储液池。下部通道是灌注通道,用于对附着在膜上的细胞施加限定的剪切应力。上部通道和下部通道仅通过隔膜彼此连通。
多孔膜由氮化硅(SiN)制成,这种材料具有非常高的化学和机械稳健性。400nm厚的氮化硅膜非常适合成像和显微镜观察,没有任何自发荧光或透明度问题(如玻璃)。SiN材料可以直接用于贴壁细胞培养,也可以选择用ECM蛋白包被。
应用建议:孔径 & 孔密度
什么是孔密度
孔密度是指膜的空隙体积分数。是孔隙的体积除以膜的总体积。下面的图形为采用相同的放大倍数。
不同应用的建议孔径:
Intended Use 经证实的应用:
这些应用已由ibidi研发团队或者我们的用户进行过试验。
Endothelial Barrier Assays 内皮屏障分析
在膜的一侧培养细胞单层。细胞可以在静止或者流动剪切力条件下培养。
Co-Culture and Cell Barrier Assays 共培养和细胞屏障分析
在膜的两侧分别培养单层细胞。通过这种方法可以进行信号传递、共培养以及迁移实验(例如,分析药物通过上皮或内皮屏障的传递)。
Apical-Basal Cell Polarity Assays 顶端-基底端细胞极性分析
3D凝胶基质中的化学因子可以导向在膜另一侧培养的单层细胞的极性发生。
Potential Use 潜在应用:
Trans-Membrane Migration in 2D/2D 跨膜迁移
在膜的一侧培养单层细胞。可以观察悬浮的白细胞在流动状态下的滚动、粘附以及侵袭情况。
Cell Transport in a 3D Gel Matrix 细胞在3D凝胶基质中的传递
3D凝胶基质中的细胞迁移:在流动状态下,观察白细胞的滚动、粘附以及向3D凝胶基质中肿瘤细胞方向的迁移情况。
Application Examples 应用实例
MDCK和NIH-3T3细胞的相差显微镜观察
Madin-Darby犬肾(MDCK,左)和NIH-3T3(右)细胞在µ-Slide ibiPore SiN,孔径0.5µm的玻片中,无蛋白质包被。接种后,将细胞在静态条件下在培养箱中保持20小时。相差显微镜,4倍物镜。请注意,这张图像中的中心多孔区域看起来更暗,因为0.5µm的孔隙无法用低分辨率物镜分辨。
流动条件下HUVECS的相差显微观察
人脐静脉上皮细胞(HUVEC)在µ-Slide ibiPore SiN中,孔径3µm的玻片中,有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件(10达因/cm²)下在培养箱中保持12小时。固定后的相位对比显微镜,10倍物镜。
流动下HUVECs F肌动蛋白细胞骨架的荧光显微镜观察
人脐静脉上皮细胞(HUVEC)在µ-Slide ibiPore SiN,孔径5µm玻片中的免疫荧光染色,有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件(10达因/cm²)下在培养箱中保持12小时。绿色:肌动蛋白(鬼笔肽),蓝色:细胞核(DAPI)。荧光显微镜,20倍物镜。
选择指南:ibidi 跨膜分析实验解决方案
µ-Slide I Luer 3D
µ-Slide ibiPore SiN
玻片原理
界面原理
基于凝胶的
基于膜的
细胞基质
软水凝胶(如胶原蛋白或基质凝胶)
不同孔径的硬质膜
显微成像
受到凝胶光学的限制
没有限制
流体应用
通道中明确的剪切力
下部通道中明确的剪切力
应用
屏障功能
是
是
迁移
是
是
细胞极化
是
是
剪应力
是
是
参考文献:
Salvermoser, Melanie, et al. "Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation." Blood, The Journal of the American Society of Hematology 131.17 (2018): 1887-1898. 10.1182/blood-2017-10-811851
Rohwedder, Ina, et al. "Src family kinase-mediated vesicle trafficking is critical for neutrophil basement membrane penetration." Haematologica (2019). 10.3324/haematol.2019.225722
Non-Recommended Applications 不建议的应用
因技术原因,本产品不适用于以下应用,应避免使用.
本产品不适用于:
1.上通道灌注
2.两个通道的灌注
3.跨膜流动
4.筛选应用
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